Ինչպե՞ս որոշել օպտիմալ կոնցենտրացիան:
Ինդուկտոր IPTG-ի համար (իզոպրոպիլ-բետա-d-թիոգալակտոզիդ), որքան բարձր է կոնցենտրացիան, այնքան լավ:Օպտիմալ կոնցենտրացիան կախված է կոնկրետ փորձարարական պայմաններից և ցանկալի ինդուկցիոն էֆեկտից:
Ընդհանուր առմամբ, IPTG-ի կոնցենտրացիան օգտագործվում է 0,1-1 մՄ միջակայքում:Ավելի ցածր կոնցենտրացիաները կարող են նվազեցնել անբարենպաստ ազդեցությունները բջիջների աճի վրա և կարող են նվազեցնել ցիտոտոքսիկությունը թիրախային սպիտակուցների գերարտահայտման պատճառով:Ավելի բարձր կոնցենտրացիաները կարող են առաջացնել բջիջների նյութափոխանակության ավելցուկային բեռ՝ ազդելով բջիջների աճի և արտահայտման արդյունավետության վրա:
Օպտիմալ կոնցենտրացիան որոշելու ճանապարհը կարող է լինել թիրախային սպիտակուցի արտահայտման մակարդակի գնահատումը տարբեր կոնցենտրացիաներում IPTG ինդուկցիոն թեստեր անցկացնելով:Փոքր մասշտաբի կուլտուրայի թեստերը կարող են իրականացվել օգտագործելով IPTG կոնցենտրացիաների մի շարք (օրինակ՝ 0,1 մՄ, 0,5 մՄ, 1 մՄ և այլն), և տարբեր կոնցենտրացիաներում արտահայտման ազդեցությունը կարող է գնահատվել թիրախային սպիտակուցի արտահայտման մակարդակը հայտնաբերելու միջոցով (օրինակ՝ արևմտյան բլոտի կամ ֆլուորեսցենտային հայտնաբերում):Ըստ փորձարարական արդյունքների, որպես օպտիմալ կոնցենտրացիան ընտրվել է լավագույն արտահայտչական ազդեցություն ունեցող կոնցենտրացիան:
Բացի այդ, դուք կարող եք նաև հղում կատարել համապատասխան գրականությանը կամ այլ լաբորատորիաների փորձին՝ հասկանալու համար սովորաբար օգտագործվող IPTG կոնցենտրացիայի տիրույթը նմանատիպ փորձարարական պայմաններում, այնուհետև օպտիմալացնել և հարմարեցնել փորձարարական կարիքներին համապատասխան:
Կարևոր է նշել, որ օպտիմալ կոնցենտրացիան կարող է տարբեր լինել՝ կախված արտահայտման տարբեր համակարգերից, թիրախային սպիտակուցներից և փորձարարական պայմաններից, ուստի լավագույնն այն է, որ օպտիմալացնելը յուրաքանչյուր դեպքի հիման վրա:
Հրապարակման ժամանակը՝ Sep-28-2023