ONPG CAS:369-07-3 Արտադրողի գին

ONPG-ի՝ որպես սուբստրատի ազդեցությունը պետք է կտրվի β-գալակտոզիդազ ֆերմենտի կողմից, որի արդյունքում առաջանում է դեղին արգասիքի՝ o-նիտրոֆենոլի արտազատում: Այս գույնի փոփոխությունը կարող է չափվել սպեկտրոֆոտոմետրիկորեն, ինչը թույլ է տալիս քանակականացնել β-գալակտոզիդազի ակտիվությունը: ONPG-ի կիրառումը հիմնականում մոլեկուլային կենսաբանության և մանրէաբանության հետազոտություններում գեների արտահայտման գնահատման մեջ է: Այն սովորաբար օգտագործվում է β-գալակտոզիդազի ակտիվությունը չափելու համար՝ որպես գեների արտահայտման ուսումնասիրությունների ռեպորտեր, մասնավորապես՝ E. coli-ի նման մանրէների մոտ: lacZ գենը, որը կոդավորում է β-գալակտոզիդազը, հաճախ օգտագործվում է որպես գեների արտահայտման վերլուծության մարկեր, քանի որ դրա արտահայտությունը կարող է առաջանալ որոշակի պայմաններով կամ վերահսկվել որոշակի պրոմոտորների կողմից: ONPG թեստը ապահովում է հարմար և հուսալի մեթոդ՝ գեների արտահայտման մակարդակը գնահատելու համար՝ β-գալակտոզիդազի ակտիվությունը չափելով: Այս թեստը լայնորեն կիրառվում է տարբեր կիրառություններում, ինչպիսիք են պրոմոտորի ակտիվության, գեների կարգավորման և սպիտակուց-սպիտակուց փոխազդեցությունների ուսումնասիրությունը: Բացի այդ, այն կարող է օգտագործվել ֆերմենտային կինետիկան որոշելու և մուտացիաների կամ բուժումների ազդեցությունը ֆերմենտային ակտիվության վրա գնահատելու համար: