Ֆենիլգալակտոզիդ CAS: 2818-58-8

Ազդեցությունը ֆերմենտային ակտիվության վրա. Ֆենիլգալակտոզիդը սովորաբար օգտագործվում է β-գալակտոզիդազ ֆերմենտի ակտիվությունը չափելու համար: Երբ ֆենիլգալակտոզիդը հիդրոլիզվում է β-գալակտոզիդազի կողմից, այն արտազատում է p-նիտրոֆենոլ: p-նիտրոֆենոլի կուտակումը կարող է քանակապես չափվել, ինչը հնարավորություն է տալիս պատկերացում կազմել β-գալակտոզիդազի ակտիվության մասին: Այս ազդեցությունն օգտագործվում է այնպիսի կիրառություններում, ինչպիսիք են ֆերմենտային փորձարկումները և սկրինինգային համակարգերը:

Գեների արտահայտման վերլուծություն. Ֆենիլգալակտոզիդը հաճախ օգտագործվում է որպես սուբստրատ մոլեկուլային կենսաբանության փորձերում՝ գեների արտահայտումն ուսումնասիրելու համար: lacZ գենը, որը կոդավորում է β-գալակտոզիդազը, սովորաբար միաձուլվում է այլ հետաքրքրության գեների կարգավորիչ հաջորդականությունների հետ: LacZ գենի արտահայտումը և ֆենիլգալակտոզիդի հիդրոլիզը β-գալակտոզիդազի կողմից կարող են ցույց տալ ուսումնասիրվող թիրախային գենի արտահայտման օրինաչափությունը և մակարդակը:

Սկրինինգային համակարգեր. Ֆենիլգալակտոզիդը β-գալակտոզիդազի ակտիվությունն օգտագործող սկրինինգային համակարգերի կարևոր բաղադրիչ է: Լայնորեն հայտնի օրինակներից մեկը կապույտ-սպիտակ սկրինինգի մեթոդն է, որն օգտագործվում է մոլեկուլային կենսաբանության փորձերում ռեկոմբինանտ կամ տրանսֆորմացված բջիջները նույնականացնելու համար: Ռեկոմբինանտ ԴՆԹ-ն հաջողությամբ կլանած կամ գենետիկ ռեկոմբինացիայի ենթարկված գաղութները կարտահայտեն β-գալակտոզիդազ, ինչը կհանգեցնի ֆենիլգալակտոզիդի հիդրոլիզին և կապույտ գույնի առաջացմանը:

Սպիտակուցի մաքրում. Որոշ դեպքերում ֆենիլգալակտոզիդը կարող է օգտագործվել որպես լիգանդ աֆինային քրոմատոգրաֆիայի համար՝ β-գալակտոզիդազին հատուկ կապվող կամ դրա կողմից ակտիվացվող սպիտակուցները մաքրելու համար: Հետաքրքրող սպիտակուցը կարող է ունենալ աֆինենտության պիտակ կամ միաձուլման պիտակ, որը պարունակում է β-գալակտոզիդազին կապող դոմեն: Սպիտակուցային խառնուրդը անցկացնելով անշարժացված ֆենիլգալակտոզիդով սյունակի միջով, ցանկալի սպիտակուցը կարող է ընտրողաբար պահպանվել և հետագայում էլուացվել: